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促进我国奶牛业的健康发展提高乳制品的质量的重要性

2011-11-02 01:59:43中国医药招标网

  

1.材料和方法  

1.1.病料386份无菌采集的乳房炎乳样。隐性型乳房炎阳性乳样142份,临床型乳房炎乳样244份。

  1.2.培养基与试剂TATC培养基、玉米吐温80培养基、沙堡罗氏培养基、含5%犊牛血清营养琼脂、含5%脱纤兔血营养琼脂、普通营养琼脂,葡萄糖蛋白胨水、营养肉汤,兔血清,吖啶橙,TTC

1.3.药敏纸片标准药敏纸片购自杭州天和微生物试剂有限公司,宫乳康、乳炎必治药敏纸片按常规方法自制。

  1.4.病原菌分离培养将采集的乳样直接镜检,取疑似真菌的乳样分别接于普通培养基、5%犊牛血清培养基、沙堡罗氏培养基,37 ℃培养48h,将培养物纯化后,接种玉米吐温80培养基,5%脱纤兔血液培养基、葡萄糖蛋白胨水、营养肉汤。

  1.5.病原特性鉴定将纯培养物革兰氏染色后镜检。厚壁孢子试验用小培养法,置湿盒内37 ℃培养48h镜检。

  TATC培养基显色试验,参照文献中的方法。牙管试验参照文献介绍的方法。荧光染色,参照文献中介绍的方法。用吖啶橙染色,荧光显微镜下检查菌体的荧光反应。

  1.6.药敏试验按照Kirby_Bauer琼脂扩散法操作,将标准药敏纸片和自制药敏纸片无菌操作贴于涂有病原菌的5%犊牛血清营养琼脂上。

  1.7.流行病学调查采集规模化养殖场临床型(157份)和隐性型(142份)乳房炎奶样共299份;济南、泰安、临沂个体养殖户奶牛奶样87份,进行真菌的培养、分离鉴定。

  2.结果与分析

  2.1.病原菌的分离鉴定

  2.1.1.培养特性:普通培养基5%犊牛血清培养基上生长良好,培养48h后形成乳白色菌落,圆形凸起,表面光滑湿润。在5%脱纤兔血营养琼脂上能生长,不溶血,培养3d后长出乳白色小菌落,圆形突起,表面光滑。

  在沙堡罗氏培养基上培养24h后可形成菌落,但菌落较小,继续培养3d后,菌落变大。为乳白色圆形菌落,表面光滑。玉米吐温80培养基培养基上,为乳白色圆形隆起,表面光滑。

  用葡萄糖蛋白胨水、营养肉汤静置培养3d,均无菌膜生长,菌体乳白色、沉于管底,上层液体澄清。

  2.1.2.病原特性:通营养琼脂、血清琼置,血液琼脂上生长的乳白色菌落,经革兰氏染色镜检,可见卵圆形、椭圆形、瓜子样革兰氏阳性菌。可见到明显的牙管。

  1%吐温80玉米琼脂上直接镜检可见到假菌丝,菌丝顶端或侧端可见到厚壁孢子。

  TCTA培养基上培养24h出现红色,培养48h红色加深,镜检见到假菌丝、厚壁孢子。荧光显微镜下可见黄绿色的菌体。

  2.1.3.药敏试验结果:洁霉素、麦迪霉素、卡那霉素、丁氨卡那霉素、四环素、妥布霉素、庆大霉素、新霉素、红霉素、羧苄青霉素、万古霉素、氟哌酸、头孢哌酮、头孢呋新、呋喃妥因、宫乳康、乳炎必治、多黏菌素B、氯林可霉素均无抑菌作用。

  2.2.流行病学

  2.2.1.济南市某规模化养殖场真菌感染情况调查:临床型和隐性型乳房炎均有真菌感染,临床型乳房炎(13.21%)高于隐性型乳房炎(9.62%)(见表1),混合感染的发生率临床型乳房炎(10.38%)低于隐性性乳房炎(14.42%),这可能与临床型经历过药物治疗有关。真菌混合感染乳样阳性率临床型为9.43%,隐性型5.77%,总计达7.62%。混合感染真菌乳样占总混合感染乳样阳性率均比较高,临床型可高达90.91%,隐性型40%,总计达61.54%。占分离株的比率临床型为11.96%、隐性型8.33%、总计为10.27%。

  说明真菌已逐渐成为引起乳房炎的主要病原菌,但目前还未引起人们的足够重视。

  2.2.2.个体养殖户奶牛真菌感染情况调查:不同地区个体养殖户奶牛均有真菌感染,乳样真菌感染率非常高。泰安地区最高(41.94%),其次是济南市(35%),临沂市最低(16.67%)。混合感染乳样阳性率泰安48.39%,济南40%,临沂33.33%,总计为43.86%。混合感染真菌乳样阳性率各地区均比较高,泰安19.35%、济南20%、临沂16.67%。真菌占总分离菌株数的百分率为:泰安32.5%、济南23.33%、临沂12.5%,总计26.92%。真菌占阳性感染奶样百分贾玉萍,等。

  真菌性乳房炎病原菌的分离鉴定与流行病学调查

  2.2.3.规模化养殖场与个体养殖户奶牛真菌感染情况比较:规模化养殖场奶样病原菌阳性率(70.23%)高于个体养殖户(65.52%),规模化养殖场的混合感染乳样阳性率(12.38%)明显低于个体养殖户(43.86%),这可能与饲养管理,及环境卫生有关。

  个体养殖户管理较差,环境卫生不如集约化养殖场。

  真菌占分离菌株百分率和占阳性感染奶样百分率个体养殖户均高于规模化养场,说明个体养殖户真菌感染情况比规模化养殖场严重。

  2.2.4.临床型和隐性型总奶样情况的比较:临床型乳样与隐性型的比较显示,真菌的检出率前者(14.34%)显著高于后者(9.62%)。病原菌奶样阳性率临床型(66.80%)低于隐性型(73.24%),真菌的感染率前者(14.34%)显著高于后者(9.62%)。结果显示,临床型乳房炎感染真菌的程度高于隐性乳房炎,但隐性乳房炎的感染率也非常高,因其不表现临床症状,实际造成的危害更大。因此,有必要对不表现临床症状的奶牛做定期的真菌感染情况调查。早预防,避免引起大规模流行,造成重大的经济损失。真菌感染奶样百分率总计为18.15%,占分离株百分率为14.29%,说明真菌类病原菌已成为引起乳房炎的主要病原菌之一。

  3.小结与讨论

  3.1.根据培养特性、病原特性、药敏试验等鉴定病原菌为白色念珠菌。

  3.2.不同地区、不同类型的乳房炎均有真菌感染,规模化养殖场真菌的感染率低于个体养殖户,说明前者的环境卫生管理、消毒意识、无菌操作意识好于后者。隐性型乳房炎、临床型乳房炎均有真菌感染,这就为防制乳房炎带来了困难,因隐性乳房炎部表现临床症状,酵母杨真菌又是接触性病原菌,普通抗生素对真菌无效,一旦被真菌感染就很难根除。目前还没有很好的治疗真菌的兽药,因此,如何防止真菌的感染应作为防止奶牛乳房炎的重点。了解真菌在我国奶牛业中的感染情况也是非常必要的。多数真菌分离株的乳样为混合感染,占病原菌的比率比较高。

  表明真菌多数是医源性感染或继发感染,在治疗细菌性乳房炎时,注意严格消毒、无菌操作是防止真菌感染的有效途径之一。

  3.3.本文的调查结果表明,真菌引起的乳房炎已相当严重,但由于对之认识不足,无论是在防治方面,还是病原菌的分离鉴定方面,均未引起足够的重视。

  因样本数不多,虽不能反应我国奶牛业中真菌感染的总体情况,但至少说明山东部分地区,真菌感染乳房炎的比率已相当高,从表4中也可以看出,真菌占病原菌分离率高达18.15%。

  3.4.本文从规模化养殖场与个体养殖户,临床型与隐性型,不同地区间真菌感染情况作了比较。从表中可以看出他们之间都存在着明显的差异。因规模化养殖场环境卫生条件好于个体养殖户,治疗器具的无菌意识好于个体,因此,真菌感染率较低。临床型与隐性型均分离到了真菌,特别是隐性乳房炎,这就更应该因起我们的注意,如何防止真菌感染健康奶牛,怎样避免隐性乳房炎奶牛感染真菌,应作为今后研究的重点。不同地区均分离到了真菌,说明真菌感染奶牛的广泛性,但所占百分率不同,除了样本数不同外,可能还与地域差异有关。

  3.5.细菌繁殖可抑制真菌的生长。反复应用广谱或多种抗生素后,细菌不断被抑制或杀死,而真菌不断得到生长繁殖的机会,造成菌群失调,导致真菌感染。

  如何正确使用抗生素,是防止真菌感染、生长繁殖,减少经济损失的一个有效途径。

  3.6.目前,我国的奶牛养殖业主要是小规模养殖,以农户散养的居多。不同地区个体养殖户的真菌性乳房炎发生率非常高。因此提高基层兽医人员的专业素质、奶牛养殖户的环境卫生意识、乳房炎治疗器具的无菌意识等,对促进我国奶牛业的健康发展、提高乳制品的质量具有不可忽视的重要作用。

 

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